СОЗДАНИЕ ГИБРИДИЗАЦИОННОГО ЗОНДА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ МЕТОДОМ FISH

Алина Константиновна Комина; Виктория Васильевна Стаффорд; Алексей Михайлович Гулюкин

doi:10.31857/2500-2082/2023/3/95-97

Алина Константиновна Комина, младший научный сотрудник ФГБНУ «Федеральный научный центр – Всероссийский исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук»
Виктория Васильевна Стаффорд, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник ФГБНУ «Федеральный научный центр – Всероссийский исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук»
Алексей Михайлович Гулюкин, член-корреспондент РАН ФГБНУ «Федеральный научный центр – Всероссийский исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук»

DOI: https://doi.org/10.31857/2500-2082/2023/3/95-97

Аннотация

В статье представлены данные по созданию ДНК-зонда для применения во флуоресцентной гибридизации in situ на криотомных гистологических срезах образцов внутренних органов свиней. Данный метод диагностики актуален при инаппаратном течении инфекции, которая способствует поддержанию вирусной нагрузки внутри стада, не проявляясь выраженными клиническими признаками. Кроме этого, метод способствует выявлению вируса в патологическом материале в период поствиремии. В нашей работе отражены этапы создания ДНК зонда размером 173 п.о. соответствующего участку гена гликопротеина Е2 вируса классической чумы свиней. Зонд проверяли на миндалинах от инфицированных вирусом свиней, в качестве отрицательного контроля использовали миндалины от здоровых, не привитых от КЧС свиней. Получены хорошие результаты применения зонда, отражающие его высокую специфичность и избирательность в образцах положительного контроля. Экспериментальные данные легли в основу наших дальнейших исследований в области инфекционной патологии сельскохозяйственных животных.

Литература

1. Величко Н.В., Рабочая Д.Е., Макеева А.С., Пиневич А.В. Таксономическое разнообразие цианобактерий в антарктических почвенных сообществах, выявленное методом флуоресцентной in situ гибридизации. В сб.: Микроорганизмы и плодородие почвы. Мат. I Всеросс. науч.-практ. конф. с межд. уч., посвящ. 90-летию со дня рождения профессора Е.М. Панкратовой. 2022. С. 27-30.
2. Каракулов Р.К., Кайдарова Д.Р., Душимова З.Д. и др. Дифференцированный подход к терапии диффузной В-крупноклеточной лимфомы с учетом статуса с-MYC и BCL2. Онкогематология. 2022. Т.17. №1. С. 37-42. DOI: 10.17650/1818‑8346‑2022‑17‑1‑37‑42
3. Шкаврова Т.Г., Михайлова Г.Ф., Цепенко В.В., Голуб Е.В. База данных частоты стабильных аберраций хромосом у детей, проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях после чернобыльской аварии. Свидетельство о регистрации базы данных 2022620536, 15.03.2022. Заявка № 2022620389 от 09.03.2022.
4. Choi C., Chae C. Localization of classical swine fever virus in male gonads during subclinical infection. J Gen Virol. 2002 Nov; 83(Pt 11):2717-2721. doi: 10.1099/0022-1317-83-11-2717.
5. Choi C., Chae C. Detection of classical swine fever virus in the ovaries of experimentally infected sows. J Comp Pathol. 2003 Jan; 128(1):60-6. doi: 10.1053/jcpa.2002.0607.
6. Fan Y-H, Lin Y-L, Hwang Y-C. et al. T-cell factor-4 and MHC upregulation in pigs receiving a live attenuated classical swine fever virus (CSFV) vaccine strain with interferon-gamma adjuvant. Vet J. 216. Р. 148-56. doi: 10.1016/j.tvjl.2016.07.009.
7. Ha S.-K., Choi C., Chae C. Development of an optimized protocol for the detection of classical swine fever virus in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues by seminested reverse transcription-polymerase chain reaction and comparison with in situ hybridization. Research in Veterinary Science. 2004. 77. Р. 163–169
8. Nagarajan K., Saikumar G. Fluorescent in-situ hybridization technique for the detection and localization of classical swine fever virus in infected tissues. Veterinarski Arhiv. 82 (5). 2012. P. 495-504.
9. URL: https://www.oie.int/en/what-we-do/standards/codes-and-manuals/terrestrial-manual-online-access/
10. Zhang Q., Xu Lu, Zhang Y. et al. A novel ViewRNA in situ hybridization method for the detection of the dynamic distribution of Classical Swine Fever Virus RNA in PK15 cells. Virology Journal. 2017. 14(1):81. DOI 10.1186/s12985-017-0734-4